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色譜分析的技術(shù)方法

色譜分析的技術(shù)方法

  色譜分析的柱色譜

  柱色譜法是*原始的色譜方法,這種方法將固定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中,將被樣品飽和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端,以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種,一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫,一種是自下而上依靠毛細(xì)作用洗脫。收集分離后的純凈組分也有兩種不同的方法,一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一種方法是烘干固定相后用機械方法分開各個色帶,以合適的溶劑浸泡固定相提取組分分子。柱色譜法被廣泛應(yīng)用于混合物的分離,包括對有機合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分離。色譜分析的技術(shù)方法

  色譜分析的薄層色譜

  薄層色譜法是應(yīng)用非常廣泛的色譜方法,這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上形成薄層,用毛細(xì)管、鋼筆或者其他工具將樣品點染于薄板一端,之后將點樣端浸入流動相中,依靠毛細(xì)作用令流動相溶劑沿薄板上行展開樣品。薄層色譜法成本低廉操作簡單,被用于對樣品的粗測、對有機合成反應(yīng)進程的檢測等用途。

  色譜分析的氣相色譜

  氣相色譜是機械化程度很高的色譜方法,氣相色譜系統(tǒng)由氣源、色譜柱和柱箱、檢測器和記錄器等部分組成。氣源負(fù)責(zé)提供色譜分析所需要的載氣,即流動相,載氣需要經(jīng)過純化和恒壓的處理。氣相色譜的色譜柱一般直徑很細(xì)長度很長,根據(jù)結(jié)構(gòu)可以分為填充柱和毛細(xì)管柱兩種,填充柱比較短粗,直徑在5毫米左右,長度在2-4米之間,外殼材質(zhì)一般為不銹鋼,內(nèi)部填充固定相填料;毛細(xì)管柱由玻璃或石英制成,內(nèi)徑不超過0.5毫米,長度在數(shù)十米到一百米之間,柱內(nèi)或者填充填料或者圖布液相的固定相。柱箱是保護色譜柱和控制柱溫度的裝置,在氣相色譜中,柱溫常常會對分離效果產(chǎn)生很大影響,程序性溫度控制常常是達(dá)到分離效果所必須的,因此柱箱扮演了非常重要的角色。檢測器是氣相色譜帶給色譜分析法的新裝置,在經(jīng)典的柱色譜和薄層色譜中,對樣品的分離和檢測是分別進行的,而氣相色譜則實現(xiàn)了分離與檢測的結(jié)合,隨著技術(shù)的進步,氣相色譜的檢測器已經(jīng)有超過30種不同的類型。記錄器是記錄色譜信號的裝置,早期的氣相色譜使用記錄紙和記錄器進行記錄,記錄工作都已經(jīng)依靠計算機完成,并能對數(shù)據(jù)進行實時的化學(xué)計量學(xué)處理。氣相色譜被廣泛應(yīng)用于小分子量復(fù)雜組分物質(zhì)的定量分析。

  色譜分析的高效液相色譜

  高效液相色譜 (HPLC)是目前應(yīng)用*多的色譜分析方法,高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進樣系統(tǒng)要求進樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。

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